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海洋天然产物如何提取分离(海洋天然产物提取分离纯化的流程和技术)

来源:www.shuishangwuliu.com   时间:2023-06-17 17:48   点击:269  编辑:jing 手机版

1. 海洋天然产物提取分离纯化的流程和技术

分菌株对应的噬菌体分离过程步骤:

1、噬菌体分离

(1) 以新鲜鸽粪4g 加入100ml 普通液体培养基内,放入37 ℃温箱培养24h。

(2) 次日从中取出10ml70 ℃加热30min ,离心2000r/ 10min ,上清液用滤器过滤后保存于4 ℃冰箱备用。

(3) 在普通琼脂平板底面分别注明1、2、3 号。

(4)在1 号平板接种事先培养好的6h 幼龄菌乙型副伤寒杆菌一接种环;2 号平板接种幼龄菌福氏痢疾杆菌一接种环;3 号平板接种幼龄菌大肠杆菌一接种环,各平板的细菌密集涂布于琼脂平板表面。

(5) 再用无菌接种环取鸽粪培养滤液一接种环,分别滴加于3 个已接种细菌的平板中央,放入37 ℃温箱孵育24h。

2、噬菌体的分离和鉴定

先后从农贸市场采集各类海产品158 份, 分别用15 株假单胞菌作指示菌, 共分离到27 株噬菌体, 分离率为1711%。检出的噬菌体经实验室反复增殖、裂解等鉴定试验, 从中精选出9 株裂解力较强, 生物学性状较典型的噬菌体, 分别用双层琼脂法作单斑纯化培养。

这9 株噬菌体的噬菌斑圆形透明, 边缘有的整齐有的稍不整齐, 直径均在110~210 mm; 在电镜下的形态可见有头部和尾部, 均呈蝌蚪状; 增殖液的效价均可达10829pfuˆm l。

3、噬菌体的分离

在有指示菌的双层琼脂平板上逐格滴加备用的待检噬菌体液,进行交叉裂解试验,即每一株菌均被所有待检噬菌体液逐一滴加。

待平皿干后,置37 ℃培养过夜。若有相应的噬菌体存在,即可在平皿上出现裂解噬斑(即为阳性) ,不裂解者为阴性。对分离到的每一噬菌体均经单噬斑分离纯化3 次以上,增殖后置4 ℃冰箱保存。

4、大连近海河流弧菌Ⅱ噬菌体的分离与研究

4.1  材料与方法

4.2  菌株

噬菌体分离所用的指示菌为河流弧菌29301 , 用于宿主范围测定的菌株共8 株: 河流弧菌Ⅱ9302 , 9401 , 9402 , 9403 , 9404 , 9501 , 9502 及9503 均为本实验室保存。

4.3  培养基

培养河流弧菌及噬菌体分离所用的培养基为海水胰蛋白胨培养基。其中: 胰蛋白胨10g , 酵母膏5g , 陈海水1000mL , pH712~715 。制作底层培养基时, 加琼脂15g ; 制作上层培养基时, 加琼脂7g。

4.4  样品的采集和噬菌体的分离

1996、1997 年两个夏季, 从大连市水产养殖公司所属皱纹盘鲍养殖区的不同地点采集海水和海底淤积物, 每次采集10 个样品, 每个样品为同一地点采集的3 份不同水样或海底淤积物混合而成。

为了分离噬菌体, 取海底淤积物100g , 加入等量海水, 充分振荡30min , 静置, 过滤, 取上清液100mL 加入50mL 3 倍浓缩的海水胰蛋白胨及2mL 浓度为1012个/ mL 的河流弧菌2 菌悬液, 30 ℃培养过夜, 以促进噬菌体的增殖。海水样品过滤后按上述方法直接富集。

经富集后的培养液加入1/ 10 的氯仿, 30 ℃静止1h , 于4000r/ min 离心20min , 取上清液用于双层琼脂法分离噬菌体。为了纯化噬菌体, 挑取单斑连续传代, 重复进行5 次以上, 选择平板上所有噬菌斑形态和大小基本一致的材料,进行下一步研究。

2. 海水提纯

提炼物质如下:除氢(H)和氧(O)外,还有氯(Cl)、钠(Na)、镁(Mg)、硫(S)、钙(Ca)、钾(K)、溴(Br)、碳(C)、锶(Sr)、硼(B)、氟(F)、铁、钼、钾、铀、碘、金、银、和镉等。

海水是海中或来自海中的水。海水是流动的,对于人类来说,可用水量是不受限制的。海水是名副其实的液体矿产,平均每立方公里的海水中有3570万吨的矿物质,世界上已知的100多种元素中,80%可以在海水中找到,除氢(H)和氧(O)外,还有氯(Cl)、钠(Na)、镁(Mg)、硫(S)、钙(Ca)、钾(K)、溴(Br)、碳(C)、锶(Sr)、硼(B)、氟(F)、铁、钼、钾、铀、碘、金、银、和镉等。

3. 海洋天然产物提取分离纯化的流程和技术方法

宏基因组学研究的对象是特定环境中的总DNA,不是某特定的微生物或其细胞中的总DNA,不需要对微生物进行分离培养和纯化,这对我们认识和利用95%以上的未培养微生物提供了一条新的途径。已有研究表明,利用宏基因组学对人体口腔微生物区系进行研究,发现了50多种新的细菌,这些未培养细菌很可能与口腔疾病有关。此外,在土壤、海洋和一些极端环境中也发现了许多新的微生物种群和新的基因或基因簇,通过克隆和筛选,获得了新的生理活性物质,包括抗生素、酶以及新的药物等。

4. 海洋元素提取

海水中溴的浓度较高,在海水中溶解物质的顺序表中可排在第7位,平均浓度大约为67毫克/升。海水中溴的总含量有95万亿吨之多,占整个地球溴总储量的99%以上,因此可以说溴是“海洋元素”。

我们所使用的青霉素、链霉素等各种抗菌素都离不开溴。溴不仅与人类的生活和健康有关,在农业生产上也大有用途,用溴制作的熏蒸剂和杀虫剂,可以消灭害虫。

在工业方面,溴也有用武之地。目前溴大量地用作燃料的抗爆剂,把二溴乙烷同四乙基铅加到汽油中,可使燃烧后所产生的氧化铅变成具有挥发性的溴化铅排出,可防止汽油爆炸。用溴能生产一种溴丁橡胶。

5. 海洋提取物功效与作用

万通海藻钙是一种好的补钙产品。因为海藻钙是一种天然的钙源,不含有铅重金属等对人体有害物质,而且其含有丰富的矿物质和微量元素,可以促进骨骼的健康发展。此外,万通海藻钙采用了当今先进的营养技术,可以较好的被人体吸收。除了万通海藻钙,市面上还有很多其他的补钙产品。不同产品采用的钙源和营养技术不同,所以在选择补钙产品时要结合自身情况选择适合自己的产品。同时,为了更好的吸收钙质,也要在日常生活中注意饮食搭配,摄取足够的维生素D和蛋白质等。

6. 海洋天然产物提取分离纯化的流程和技术要求

1.

吸附法:为了回收铀,科研工作者们尝试了很多方法,吸附法是目前最有效的方法之一;将吸附剂装入有网眼的尼龙袋中,用船拖着在海水中飘游,或将吸附剂装入吸附柱中,把海水泵入吸附柱,通过吸附剂和海水接触而吸附铀。如用水合氧化钛吸附剂,每克吸附铀量为几十至200μg。用碱性溶液(碳酸铵或碳酸钠溶液)淋洗吸附有铀的水合氧化钛,得到含铀约9mgU/L(注:U/L是:单位/公升)的淋洗液。经过一次吸附和淋洗,铀浓度由海水中的3.3产μgU/L(注:U/L是:单位/公升)提高至淋洗液中的9mgU/L(注:U/L是:单位/公升),提高了近3000倍。但此时的铀浓度还很低,需作进一步富集。可用阴离子交换树脂进行第二次吸附,再用中性盐溶液将离子交换树脂上的铀淋洗出来。第二次淋洗液的铀浓度达3.5gU/L(注:U/L是:单位/公升)左右,可用常规方法从这种淋洗液中沉淀铀制取铀盐产品。

2.

石灰法:这种方法用廉价的石灰与海水的镁发生反应来提取铀;

3.

生物处理法:由于有些微生物天然存在含铀的矿物或基质中,可以利用这些微生物使海水中的铀转化为不溶与水的形式;

7. 海洋生物中分离出的天然产物类型主要有

不存在这种情况因为所有已知的海洋动物都有心脏,它是维持生命所必需的器官之一,它的功能是将血液从身体各个部位输送到肺和其他呼吸器官进行气体交换,然后由心脏再将氧气饱和的血液传送回体内各个部位。如果海洋动物没有心脏,血液无法循环,身体各个部位无法得到氧气和营养物质供应,生命将无法存续。可能出现误解的原因是,有些海洋生物体内的心脏不具备完整的结构,比如某些无脊椎动物的心脏只有一个腔室,但这并不影响它们具有心脏的生命体征。

8. 海洋生物成分提取

欧米伽-3是一种重要的多不饱和脂肪酸,可以从多种食物中提取,包括一些鱼类、植物油和其他食物中。

鱼类是欧米伽-3的主要来源之一,特别是深海鱼类,例如三文鱼、鳕鱼、金枪鱼和沙丁鱼等。这些鱼类中含有丰富的EPA(二十碳五烯酸)和DHA(二十二碳六烯酸),是人体合成欧米伽-3所必需的营养成分。另外,欧米伽-3还可以从其他动物来源中提取,如牛奶、乳制品和蛋黄等。

植物油也是欧米伽-3的一种来源,尤其是亚麻籽油、荞麦油、菜籽油、葵花籽油等。这些植物油中含有α-亚麻酸,是欧米伽-3的前体物质,可以通过人体代谢转变成EPA和DHA。

此外,一些食品和营养补充剂中也添加了欧米伽-3,如鱼油、海藻油、藻类等。

总之,欧米伽-3可以从多种食物中提取,但是深海鱼类、亚麻籽油和鱼油等是欧米伽-3最常见和有效的来源。

9. 海洋提取物有哪些

形容大海的水只要一瓢的成语是:弱水三千只取一瓢[ ruò shuǐ sān qiān zhī qǔ yī piáo ]

源起佛经中的一则故事,寓意在一生中可能会遇到很多美好的东西,但只要用心好好把握住其中的一样就足够了。也比喻对爱情忠贞、专一。

引用:近代诗人苏曼殊的《碎簪记》,里面有段对白:余曰:然则二美并爱之矣。庄湜复叹曰:君思‘弱水三千’之意,当知吾心。又问:然君意属谁先?余曰:淑芳。

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